
Hal-tallaabo Multiplex RT-qPCR Premix-UNG
Bisadda No: HCB5145A
Xirmada Baaritaanka Hal Tilaabo ee Multiplex ee RT-qPCR (UDG Plus) waa xirmo tiro badan oo PCR ah oo ku saleysan RNA qaab ahaan.Intii lagu guda jiray tijaabada, qoraal-ku-celinta iyo tirada PCR-ga ayaa lagu sameeyay isla tuubo isku mid ah, taas oo fududaysay hawlgalka tijaabada ah oo yaraysay khatarta wasakhowga.Qalabkan, cDNA-gii ugu horreeyay waxaa si hufan u soo saaray kulaylka u adkaysta Reverse Transcriptase oo tiro ahaan lagu xoojiyay HotStart Tag DNA Polymerase.Qalabka inta badan waxa uu ka kooban yahay kaydinta MP la hagaajiyay, isku darka enzymes, iwm2+iyo dNTP.Intaa waxaa dheer, qodobbada si wax ku ool ah u joojin kara kor-u-qaadista PCR-ga aan gaarka ahayn iyo wanaajinta waxtarka xoojinta fal-celinta qPCR ee badan ayaa lagu daraa, taas oo hubin karta waxtarka-weyneynta oo fulinaysa ilaa falcelin-weyneyn badan.Nidaamka dUTP/UDG ayaa lagu daray si wax ku ool ah looga hortago khatarta wasakhowga hawada.
Qaybaha
1. Bakhaar
2. Isku-dhafka Enzyme
Tilmaamid
Bilow kulul | Bilawga kulul ee la dhisay |
Habka ogaanshaha | Ogaanshaha hore ee baaritaanka |
Habka PCR | Hal tallaabo RT-qPCR |
Polymerase | Taq DNA polymerase |
Nooca muunada | DNA |
Xaaladaha Kaydinta
Alaabta waxaa lagu raray baraf qallalan waxaana lagu kaydin karaa -25 ~ -15℃ 1 sano.Waa inay iska ilaalisaa soo noqnoqdabaraf-dhalaalid.Waxaa lagu talinayaa in si gaar ah loo kaydiyo.
Tilmaamaha
1.Falcelinta Nidaamka
Qaybaha | Mugga (μL) | U-fiirsashada kama dambaysta ah |
2 × MP kayd | 12.5 | 1× |
Isku qas Enzyme | 1 | - |
Isku darka aasaasiga ah/Baaraha (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
Template RNA | 1-10 | - |
RNase bilaash ah H2O | ilaa 25 | - |
Xusuusin:
Hubi inaad si fiican u qasto ka hor isticmaalka, ka fogow xumbo xad dhaaf ah oo uu keeno gariir rabshado wata.
a.Feejignaanta koowaad: Isku darka aasaasiga ah oo ay ku jiraan Primer multiplex, taas oo ku xidhan xaaladda u-fiirsashada ugu fiican ee asaasiga ah ee u dhexeeya 0.l iyo 1.0μM.
b.Fiirinta baaritaanka: Isku darka baaritaanka oo ay ku jiraan calaamadeynta kala duwanaanshaha baaritaanka kooxda fluorescent, iyadoo ku xiran xaaladda u-fiirsashada ugu fiicneyd ee baaritaanka laga yaabo inta u dhaxaysa 0.05 iyo 0.5μM.
c.Qaababka qaabaysan: qPCR aad bay xasaasi u tahay waxaana lagu talinayaa in la milo template.Qiimaha xakamaynta Ct wuxuu ku habboon yahay inta u dhaxaysa 20 iyo 35.
d.Diyaarinta nidaamka: Fadlan ku diyaari miiska shaqada ee aadka u nadiifka ah, iyo pipettor iyo tuubada falcelinta oo aan lahayn hadhaaga nukliyeerka;waxaa lagu talinayaa in la isticmaalo madaxa qoriga leh element filter.Ka fogow wasakhowga isdhaafka ah iyo wasakhowga hawada.
2. Baaskiilka la hagaajiyayBaratakoolka
Wareegto tallaabo | Heerkulka | Waqtiga | Wareegtada |
Dib u qorista | 50℃a | 20 daqiiqo | 1 |
Bilowga-denaturation | 95℃ | 5 daqiiqo | 1 |
Falcelinta weynaynta | 95℃ | 15 ilbiriqsi |
40-45 |
60℃ b | 30 ilbiriqsi c |
Xusuusin:
a.Qoraalka dib u celinta: Heerkulka wuxuu dooran karaa 42°C ama 50°C.
b.Falcelinta Amplification: Heerkulka waxaa lagu hagaajiyaa iyadoo loo eegayo qiimaha Tm ee aasaasayaasha nashqadeeyay.
c.Helitaanka signalka fluorescence: Fadlan habraaca tijaabada u deji sida waafaqsan shuruudaha buug-gacmeedka qalabka.
Xusuusin
Fadlan xidho PPE-ga lagama maarmaanka ah, sida jaakadaha shaybaadhka iyo galoofyada, si loo hubiyo caafimaadkaaga iyo badbaadadaada.