Universal SYBR GREEN qPCR Premix (buluug)

Bisadda No: HCB5041B

Universal Blue qPCR Master Mix (Dye Based) waa xal horudhac ah oo loogu talagalay 2×-waqtiga dhabta ah ee cabbirka PCR-ga oo lagu garto dareen sare iyo gaar ahaan, waa midab buluug ah, wuxuuna leeyahay saamaynta muunad ku-darka raadinta.Qaybta xudunta u ah Taq DNA polymerase waxay isticmaashaa bilawga kulul ee antibody-ga si ay si wax ku ool ah u joojiso kordhinta aan gaarka ahayn ee ay ugu wacan tahay nuugista asaasiga ah inta lagu jiro diyaarinta muunada.Isla mar ahaantaana, qaaciddada waxay ku daraysaa arrimo kor u qaadaya si loo hagaajiyo waxtarka xoojinta falcelinta PCR oo loo siman yahay xoojinta hiddo-wadaha ka kooban GC kala duwan (30 ~ 70%), si tirada PCR-gu ay u hesho xidhiidh toosan oo wanaagsan oo tiro ballaadhan. gobolka.Alaabtani waxa ay ka kooban tahay dheeha Tixraaca Dadban ee ROX gaar ah, kaas oo lagu dabaqi karo inta badan qalabka qPCR.Muhiim ma aha in la hagaajiyo xoogga ROX ee qalabyada kala duwan.Waxa kaliya oo lagama maarmaan ah in lagu daro aasaasayaasha iyo qaab-dhismeedka si loogu diyaariyo nidaamka falcelinta ee kor u qaadida.

Qaybaha

Isku dhafka guud ee buluuga ah ee qPCR Master Mix

Xaaladaha kaydinta

Alaabta waxaa lagu raray baraf baraf waxaana lagu kaydin karaa -25℃~-15℃ ilaa 18 bilood.Waa lagama maarmaan in laga fogaado shucaaca iftiinka xooggan marka la kaydinayo ama la diyaarinayo nidaamka falcelinta.

Tilmaamid

Tilmaamaha

1.Nidaamka falcelinta

[Fiiro gaar ah]: Si fiican isku qas ka hor intaanad isticmaalin si aad uga fogaato goobooyin badan oo gariir xoog leh.

a) Diiradda koowaad: Diiradda ugu dambaysa ee asaasiga ahi waa 0.2μmol/L, waxaana sidoo kale lagu hagaajin karaa inta u dhaxaysa 0.1 iyo 1.0μmol/L sida ku habboon.

b) Samaynta qaabaynta: Haddii qaab-dhismeedka uu yahay xalka kaydka cDNA oo aan la qasin, mugga la isticmaalay waa in aanu ka badnayn 1/10 ee mugga falcelinta qPCR.

c) Qaab-dhismeedka qaab-dhismeedka: Waxaa lagu talinayaa in lagu milo xalka kaydka cDNA 5-10 jeer.Qadarka ugu fiican ee qaab-dhismeedka lagu daray ayaa ka sii wanaagsan marka qiimaha Ct ee lagu helo xoojinta uu yahay 20-30 wareegyo.

d) Habka falcelinta: Waxaa lagu talinayaa in la isticmaalo 20μL ama 50μL si loo hubiyo waxtarka iyo soo noqnoqda ee kordhinta hidda-socodka.

e) Diyaarinta nidaamka: Fadlan ku diyaari kursiga kaydka nadiifka ah oo isticmaal talooyinka iyo tuubooyinka falcelinta iyada oo aan hadhaaga nucleuska lahayn;waxaa lagu talinayaa in la isticmaalo talooyinka leh kartoonada shaandhada.Ka fogow wasakhowga isdhaafka ah iyo wasakhowga hawada.

2.Barnaamijka falcelinta

Barnaamijka caadiga ah

Barnaamij Degdeg ah

[Fiiro gaar ah]: Barnaamijka degdega ah wuxuu ku habboon yahay inta badan hiddo-wadaha, iyo barnaamijyada caadiga ah waxaa lagu tijaabin karaa hiddo-wadaha qaabdhismeedka sare ee shakhsi ahaaneed.

a) Heerkulka iyo wakhtiga oo xajinaya: Fadlan isku hagaaji si waafaqsan dhererka asalka iyo hiddo-wadaha bartilmaameedka ah.

b) Helitaanka signalka fluorescence (★): Fadlan u deji nidaamka tijaabada si waafaqsan shuruudaha ku jira tilmaamaha isticmaalka qalabka.

c) Qalooca dhalaalka: Barnaamijka caadiga ah ee qalabka waxa loo isticmaali karaa si caadi ah.

3. Natiijooyinka Falanqaynta 

Ugu yaraan saddex nuqul oo bayooloji ah ayaa looga baahnaa tijaabooyinka tirada.Falcelinta ka dib, qalooca xoojinta iyo qalooca dhalaalka ayaa u baahan in la xaqiijiyo.

3.1 Qalooca Kordhinta:

Qalooca cod-weyneysiinta caadiga ah waa S-qaabeeya.Falanqaynta tiradu waxay aad ugu saxan tahay marka qiimaha Ct uu hoos ugu dhaco inta u dhaxaysa 20 iyo 30. Haddii qiimaha Ct uu ka yar yahay 10, waa lagama maarmaan in la milo templateka oo mar kale la sameeyo imtixaanka.Marka qiimaha Ct u dhexeeya 30-35, waxaa lagama maarmaan ah in la kordhiyo fiirsashada template ama mugga nidaamka falcelin, si loo hagaajiyo hufnaanta cod-weyney iyo in la hubiyo saxnaanta falanqaynta natiijada.Marka qiimaha Ct uu ka weyn yahay 35, natiijooyinka imtixaanku qiyaas ahaan ma falanqeyn karaan muujinta hidda-wadaha, laakiin waxaa loo isticmaali karaa falanqaynta tayada.

3.2 Qalooca dhalaalka:

Meesha ugu sarraysa ee qalooca dhalaalaysa waxay tilmaamaysaa in gaar ahaan falcelinta falcelinta ay wanaagsan tahay oo falanqaynta tirada la samayn karo;Haddii qalooca dhalaalku muujiyo labanlaab ama dhawr sare, falanqaynta tirada lama samayn karo.Qalooca dhalaalku wuxuu muujinayaa heerar sare oo labanlaab ah, waxaana lagama maarmaan ah in la xukumo in meesha ugu sarreysa ee aan bartilmaameedka ahayn ay tahay dimer-ka-soo-saarka ama kor-u-qaadka aan gaar ahayn ee DNA agarose gel electrophoresis.Haddii ay tahay dimer-ka-soo-saarka, waxaa lagu talinayaa in la yareeyo diiradda-saarrada ama dib-u-qaabaynta asaasiga ah ee waxtarka sare leh.Haddii ay tahay cod-weyneysiin aan gaar ahayn, fadlan kordhi heerkulka soo-jiidashada, ama dib-u-qaabaynta furayaasha si gaar ah.

Xusuusin

Fadlan xidho PPE-ga lagama maarmaanka ah, sida jaakada shaybaadhka iyo galoofyada, si loo hubiyo caafimaadkaaga iyo badbaadadaada!

Alaabtan waxaa loogu talagalay isticmaalka cilmi-baarista oo keliya!